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Illumina FC-121-3001--TruSeq DNA PCR-Free LT Library

更新時間:2025-06-03      點擊次數:434
Illumina FC-121-3001--TruSeq DNA PCR-Free LT Library 產品介紹
在基因測序領域,構建高質量的 DNA 文庫是獲取精準數據的關鍵前提。Illumina 公司推出的 FC-121-3001--TruSeq DNA PCR-Free LT Library,憑借創新的技術和的性能,為科研人員開展全基因組測序(WGS)等研究工作提供了理想的解決方案。
一、產品概述
TruSeq DNA PCR-Free LT Library 屬于低通量(LT)文庫制備試劑盒,主要用于構建適用于 Illumina 測序平臺的 DNA 文庫 。其設計巧妙,可實現 24 個樣本的手動處理,這一特性使得它尤其適合小型實驗室的研究項目,或是針對樣本量有限但需精細分析的科研場景。該試劑盒致力于簡化實驗流程,同時保障測序數據的高質量,幫助科研人員高效獲取復雜基因組的全面信息。
二、核心技術亮點
  1. 免 PCR 文庫構建技術:傳統的文庫構建方法常依賴 PCR 擴增步驟,然而這可能引入擴增偏好性,導致某些 DNA 片段過度或不足擴增,影響測序結果的準確性和全面性 。TruSeq DNA PCR-Free LT Library 開創性地去除了 PCR 過程,有效規避了 PCR 帶來的偏差,確保文庫中各類 DNA 片段的比例更接近樣本原始狀態。這意味著科研人員能夠獲得更均一、更能真實反映樣本基因組全貌的文庫,為后續精準檢測各類遺傳變異(如單核苷酸多態性 SNP、插入缺失 InDel 等)奠定了堅實基礎。

  1. 靈活的讀長適配能力:不同的研究項目對測序讀長的需求各異。該試劑盒具備出色的靈活性,能夠適配多種讀長設置,可滿足從較短讀長用于快速篩查,到較長讀長用于解析復雜基因組區域的多樣化需求 。例如,在對微生物基因組進行測序時,較短讀長即可滿足快速鑒定物種的需求;而在研究動植物復雜基因組的結構變異時,較長讀長能更好地跨越重復序列等復雜區域,準確識別變異類型,為深入探究遺傳機制提供有力支持。

  1. 高效的片段化與修復技術:試劑盒在 DNA 片段化過程中,采用了優化的物理或酶切方法,能夠將基因組 DNA 精準地切割成適宜長度的片段 。這些片段隨后經過末端修復、加 A 尾以及連接測序接頭等一系列精細操作,確保每個 DNA 片段都能被有效捕獲和測序。這一高效的片段化與修復技術,不僅提高了文庫構建的成功率,還保證了文庫中 DNA 片段的質量和完整性,為后續測序反應的順利進行提供了保障。

三、產品性能優勢
  1. 出色的覆蓋度:在對基因組中傳統上難以測序的區域,如高 GC 含量區域、啟動子區域以及重復序列區域的覆蓋上,TruSeq DNA PCR-Free LT Library 表現 。高 GC 含量區域由于其堿基組成特點,在測序過程中易出現信號弱、難以準確識別堿基的問題;啟動子區域的結構和功能特殊性也增加了測序難度;而重復序列則可能導致測序錯誤或丟失信息。但該試劑盒憑借的技術設計,能夠有效克服這些挑戰,為科研人員提供更全面、準確的基因組覆蓋信息,助力挖掘這些關鍵區域的遺傳信息,例如在研究基因調控機制時,準確解析啟動子區域的序列變異和甲基化狀態。

  1. 數據質量高:得益于免 PCR 技術和優化的文庫構建流程,該試劑盒生成的測序數據質量 。數據質量分數(如 Q30 分數)表現優異,意味著在測序數據中,堿基識別準確率達到 99.9% 以上的比例較高。高質量的數據減少了后續數據分析中的錯誤校正工作量,提高了研究結果的可靠性。在疾病基因檢測、腫瘤基因組分析等對數據準確性要求極為苛刻的領域,該試劑盒的數據質量優勢能夠確保準確檢測到低頻變異,為疾病的精準診斷和個性化治療提供關鍵依據。

  1. 簡化實驗流程:試劑盒采用了一體化的設計理念,所有試劑和耗材均精心配置,為全基因組測序應用提供了簡便、全面的文庫制備方案 。整個實驗流程摒棄了繁瑣的凝膠電泳步驟,減少了實驗操作步驟和時間,同時降低了人為操作誤差的引入風險。例如,在樣本處理過程中,磁珠法的應用使得 DNA 片段的純化和篩選更加高效、便捷,科研人員無需復雜的技術和大量的時間投入,即可輕松完成文庫構建,大大提高了實驗效率,使研究工作能夠更快速地推進。

四、應用領域
  1. 基礎基因組學研究:在探索各類生物的基因組結構與功能方面,TruSeq DNA PCR-Free LT Library 發揮著重要作用 。對于小型基因組,如細菌基因組,該試劑盒能夠快速、準確地完成測序文庫構建,助力科研人員深入了解細菌的遺傳特性、進化關系以及與環境的相互作用機制。在人類基因組研究中,它可用于全基因組重測序,精準檢測個體間的遺傳變異,為研究人類遺傳多樣性、疾病遺傳易感性等提供豐富的數據資源,有助于揭示復雜疾病的發病機制,為個性化醫療和遺傳咨詢提供理論基礎。

  1. 腫瘤基因組學研究:在腫瘤研究領域,準確解析腫瘤基因組的變異對于腫瘤的診斷、治療和預后評估至關重要 。該試劑盒能夠高效構建腫瘤樣本的 DNA 文庫,通過對腫瘤基因組的深度測序,科研人員可以全面檢測腫瘤相關基因的突變、拷貝數變異等遺傳改變。例如,在尋找腫瘤驅動基因時,高覆蓋度和高質量的數據能夠幫助識別出潛在的關鍵變異,為開發針對性的靶向治療藥物提供靶點;在腫瘤分子分型中,精準的基因組信息有助于更準確地對腫瘤進行分類,指導臨床醫生制定個性化的治療方案,提高腫瘤治療效果。

  1. 罕見病研究:許多罕見病由基因變異引起,且發病率低、病例分散,樣本獲取難度大 。TruSeq DNA PCR-Free LT Library 的低通量特性和高質量數據產出,使其成為罕見病研究的有力工具。科研人員可以利用該試劑盒對少量的罕見病患者樣本進行深度測序,精準檢測出致病基因的變異,為罕見病的基因診斷、遺傳咨詢以及開發潛在的治療方法提供關鍵線索,有助于改善罕見病患者的診療現狀。

五、產品使用說明
  1. 樣本要求:該試劑盒適用于多種類型的 DNA 樣本,如基因組 DNA、FFPE 樣本來源的 DNA 等 。但需注意,樣本應具備較高的質量和完整性,建議使用高質量的純化 DNA,起始量一般在 0.1 - 1 μg 之間,具體用量可根據樣本類型和實驗要求進行適當調整。在樣本處理前,需對樣本進行嚴格的質量檢測,確保其濃度、純度以及完整性符合實驗要求,以保證文庫構建的成功率和質量。

  1. 實驗操作流程:使用 TruSeq DNA PCR-Free LT Library 構建文庫的操作流程相對簡便 。首先,對 DNA 樣本進行片段化處理,可根據實驗需求選擇合適的片段化方法和條件,以獲得理想長度的 DNA 片段。隨后進行末端修復、加 A 尾以及連接測序接頭等步驟,這些操作均在試劑盒提供的專用試劑和優化的反應條件下進行。最后,通過磁珠法對文庫進行純化和篩選,去除雜質和未連接的接頭,得到高質量的文庫產物。整個過程需嚴格按照試劑盒說明書的操作步驟進行,注意反應條件的控制和試劑的使用量,以確保實驗結果的可靠性和可重復性。

  1. 系統兼容性:該試劑盒與多種 Illumina 測序儀器高度兼容,包括 NextSeq 1000、NextSeq 2000、HiSeq 2500、NovaSeq 6000 等 。科研人員可根據自身實驗需求和實驗室設備條件,靈活選擇合適的測序儀器進行文庫測序。在測序前,需根據所選儀器的特點和要求,對測序參數進行合理設置,以充分發揮試劑盒和測序儀器的性能優勢,獲得高質量的測序數據。



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